上新啦!tyc1286太阳集团正式推出USP/EP标准品采购服务
tyc1286太阳集团正式推出美国药典(USP)和欧洲药典(EP)标准品采购服务,帮助您节省繁琐的下单与进口流程,节约人力与时间成本,真正实现降本增效!2025-01-16更多>
热烈庆祝tyc1286太阳集团荣获LGC亚太区最佳销售金奖
2024年9月,在泰国普吉岛举办的2024年LGC亚太渠道合作伙伴会议上,tyc1286太阳集团因在2023-2024年度连续出色的表现,被LGC D&K K...2024-10-24更多>
tyc1286太阳集团成功举办生物制品质量控制主题线下研讨会
2024年8月20日-21日,tyc1286太阳集团联合Cygnus、舟帆生物,分别在苏州和上海举办了两场生物制品质量控制主题研讨会,研讨会邀请了Cygnus高级技术经理...2024-08-29更多>
LIVE WEBINAR | 细胞基因治疗生物工艺中应对大规模样本的下游工...
病毒载体技术的研究不断深入和发展,为遗传物质的递送提供了理想工具,成为目前细胞治疗与基因治疗的主要递送技术。然而,研究人员在细胞基因...2024-08-22更多>
新品上市 | 肉毒素纯化新选择BTXPure™多模式层析填料
肉毒杆菌毒素(简称“肉毒素”)是由肉毒杆菌产生的强效神经毒素,被广泛应用于除皱、塑形等医美领域,以及神经、康复、泌尿等临床治疗领域,且适应症仍在不断探索扩大中。目前,全球上市的肉毒素产品主要为天然A型肉毒素,市场主要被BOTOX®、Dysport®、XEOMIN®、Letybo®、NABOTA®、衡力®等几大产品占据。随着重组蛋白技术的发展,经过肉毒素领域科学家和研发专家多年探索,重组A型肉毒素凭借其高纯度、低生物风险、低免疫风险、高生产效率、低成本等优势,有望带领肉毒素行业进入新时代。由于肉毒素具有很强的毒性、复杂的分子结构以及安全应用所需的高纯度,因此其纯化工艺在规模化生产中仍有很大的挑战性。尤其是天然肉毒素的产量普遍较低,其纯化通常需要耗费大量时间和成本。BTXPure™能够显著提高肉毒素的产量和纯度,从而实现一种经济高效且流程简化的方式,安全高效,满足商业化生产所需的高标准。BTXPure™是由Astrea Bioseparations设计开发的一款多模式层析填料,专用于捕获和纯化肉毒素,对多种类型的肉毒素(包括天然的A、B、E型肉毒素,重组肉毒素等)均表现出优异的结合性能。BTXPure™的基架为粒径均一的高交联琼脂糖(PuraBead®6HF),修饰特有的多模式配基,操作流速可达600cm/h。BTXPure™填料耐碱性强,在高达1.0 M的氢氧化钠溶液中稳定,适用于严格的清洁和消毒程序。BTXPure™多模式层析填料的生产遵循ISO 9001质量管理体系,能满足大规模生产工艺的需求。Astrea Bioseparations还提供一系列即用型、预填充好的Evolve®D柱,为快速投入生产提供优化的解决方案。此外,BTXPure™多模式层析填料还有多种大包装规格以及预装柱可选择,满足cGMP生产工艺需求。Astrea Bioseparations能够为客户提供BTXPure™填料完整的法规文件,并能为客户的工艺流程申报提供支持和帮助。BTXPure™优势特点适用于多种类型肉毒素纯化,包括天然A、B、E型和重组型肉毒素;经济高效,简化下游纯化工艺流程提升肉毒素的回收率和纯度耐碱性强,适用于严格的清洁和消毒程序,可多次循环使用多种规格预装柱与散装填料可选择全面的法规文件支持,满足cGMP生产需求BTXPure™订购信息散装填料货号品名规格FG00594-00025BTXPure™25 mLFG00594-10000BTXPure™10 Liters预装柱货号品名规格4300-00005-FG00594BTXPure™Evolve®R 5 mL4300-00050-FG00594BTXPure™Evolve®R 50 mLAstrea Bioseparations于1987年孵化自剑桥大学,拥有超过30年层析介质研发和生产经验,是世界级层析介质产品与服务供应商。目前使用Astrea的产品已有超过21个生产工艺通过了FDA和EMA的批准。Astrea Bioseparations在全球拥有3个研发和生产基地,专注为生物大分子和CGT领域提供行业领先的层析介质和技术服务。Astrea Bioseparations推出的基于纳米纤维的新型层析技术,解决了传统生物分离工具载量低和工艺耗时问题,实现更快、更环保、更具成本效益的纯化过程,完全符合当今生物治疗创新的需求。tyc1286太阳集团是Astrea Bioseparations中国区代理,为用户提供完善的技术支持与售后服务。欢迎随时拨打tyc1286太阳集团客服热线400-050-4006或登录网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>【技术在线】使用Cygnus ELISA试剂盒该如何设置空白对照?
空白对照的定义及其在ELISA测定中的应用 空白对照是指在实验设计中设置的一种阴性对照,旨在监测非特异性背景信号,并为基线吸光度值提供参考。在酶联免疫吸附测定(ELISA)中,通过引入空白对照,可以有效识别并扣除样品读数中的背景噪声,从而提高检测结果的准确性。然而,在多分析物ELISA测定中,由于其固有的高背景信号特性,这种标准化方法可能并不适用。本文将详细探讨为何在Cygnus的ELISA测定中通常不建议使用空白对照。 减去背景值对多分析物ELISA检测结果的影响 在多分析物ELISA测定中,如HCP ELISA,由于HCP抗体的复杂性,其背景信号通常较高。这使得此类检测的基线吸光度值(OD值)普遍高于简单的单分析物检测。从统计学角度来看,从样品读数中减去较高的基线OD值可能会增加数据的变异程度,从而影响结果的准确性和可靠性。 以下示例说明了背景值扣除对变异系数的影响。在表1中,标准A的平均OD值为0.100,标准B的平均OD值为0.150 。当通过原始读数减去空白对照的OD值来计算变异系数(CV)时,CV值显著上升,导致标准B的CV%从6.7%增加至20%。 表1. 背景值扣除对变异系数的影响 检测背景值越高,对变异系数百分比的影响就越大。 表2展示了8种不同ELISA试剂盒在10组随机数据集中的平均变异系数(CV%)。基于原始OD值计算得出的CV%范围为10%至20%,而经过空白对照校正后的相同数据CV%则超过了20%。在所有情况下,经过空白对照校正后的CV%均高于未校正的数据。在实际应用中,分析数据放行的标准通常要求重复检测的CV%不超过20%,上述差异可能直接导致分析结果无法满足精密度要求,从长远来看,引入空白对照将直接导致测试结果无法符合放行要求。表2. 经过空白对照校正后的CV%与未校正数据的CV%值对比 从统计学角度来看,空白对照的OD值越高,出现此类问题的可能性就越大。 鉴于上述原因,Cygnus Technologies 致力于开发和提供无需背景校正的 ELISA 试剂盒。在我们已上市的 ELISA 试剂盒开发、分析及测试过程中,从未在批次放行的工作流程中引入空白对照校正步骤。相反,我们使用 0 ng/mL 标准品来设定 Y 轴截距并确定标准曲线的下限。因此,如果您在实验流程中加入了空白对照校正步骤,其获得的检测变异系数(CV)百分比很可能会高于 Cygnus 质控团队所记录的结果。Cygnus针对每一种检测试剂盒均提供相应的QS(Qualification Summary)文件,如有需求欢迎点击这里填写信息索取,或直接联系Cygnus中国总代理tyc1286太阳集团。如您在使用Cygnus HCP ELISA试剂盒的过程中遇到任何问题,我们的技术支持团队将竭诚为您提供解决方案和建议。Cygnus Technologies专注为生物技术和生物制药行业提供产品和分析方法超过25年,旨在加速研发阶段和提高产品质量。Cygnus开发和生产的生物工艺残留试剂盒,用于检测超过50种不同表达系统的特异性杂质。Cygnus作为专注于生物技术应用免疫检测的高灵敏度分析技术的专家,其产品和服务已经被全球超过95%以上生物制药公司使用,并获得FDA、NMPA、EMA等监管机构的广泛认可。tyc1286太阳集团作为Cygnus在中国总代理,与国内众多知名药企,CRO/CMO企业建立了长久稳定的合作关系。多年来tyc1286太阳集团的产品及服务帮助许多企业加速R&D阶段,提高药物质量、纯度和安全,加速优化研发工艺,减少产品上市时间,降低QC成本。如您对上述产品感兴趣,欢迎致电tyc1286太阳集团客服热线400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>新年又添喜讯!Pfanstiehl 注射级L-组氨酸 (H-116) CDE登记号已激活转A!
“ 热烈祝贺Pfanstiehl品牌注射级组氨酸H-116 CDE注册登记号F20200000338已激活!”Pfanstiehl新年喜讯频传,继注射级精氨酸才激活之际,注射级组氨酸H-116 CDE登记号F20200000338在千呼万唤中也终于激活转A了。Pfanstiehl品牌注射级组氨酸H-116,于2020年推出之际,便秉承一贯高品质理念,具有超高纯度,超低内毒素,超低金属残留的特点,单独检测29种金属离子,符合多国药典规定(USP, EP, JPE, ChP),可用于生物治疗性药物和疫苗的生产。Pfanstiehl 注射级组氨酸将于2025年3月再一次全面提升质量指标,进一步缩窄29种金属离子的质控指标,低至ppb水平;并根据FDA和EMA关于亚硝酸盐的指南,新增10种亚硝酸盐的质控;并加入DNA,RNA,DNA酶,RNA酶和脂肪酶,磷酸酶,蛋白酶等各种酶类的控制,进一步降低可能由组氨酸引入的对蛋白稳定性和对其他辅料如吐温降解的负面影响。产品信息: · 产品名称: L-Histidine, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals, USP, EP, BP, JP, ChP (H-116)· 中文名称:L-组氨酸· 分子式:C6H9N3O2· 分子量:155.15g / mol· CAS号:71-00-1· 产品货号:H-116产品特点:· 超高纯度,超低内毒素,超低微生物含量,超低金属杂质残留· 质量指标新增DNA,RNA,DNA酶,RNA酶,脂肪酶和亚硝酸盐检测· 符合多国药典:USP, EP, BP,JPE,ChP· 符合ICH Q3D标准· 符合GMP标准产品应用:· 缓冲液如果您对Pfanstiehl的注射级L-组氨酸H-116 感兴趣,可联系Pfanstiehl中国区代理tyc1286太阳集团获得详细的产品概况说明文件如下。也欢迎联系获取测试样品。Pfanstiehl Inc.产品系列如下,欢迎联系tyc1286太阳集团获取100g装免费样品。 tyc1286太阳集团为Pfanstiehl中国代理,为客户提供完善的技术支持与售后服务。欢迎拨打tyc1286太阳集团客服电话400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>喜大普奔!Pfanstiehl 注射级L-精氨酸 (A-170) CDE登记号已激活!
“ 热烈祝贺Pfanstiehl品牌注射级精氨酸A-170 CDE注册登记号F20190000412已激活!”Pfanstiehl新年喜讯频传,注射级精氨酸A-170 CDE登记号F20190000412激活了。Pfanstiehl品牌注射级精氨酸A-170,秉承一贯高品质理念,具有超高纯度,超低内毒素,超低金属残留的特点,单独检测29种金属离子,并且新增DNA,RNA,DNA酶,RNA酶和脂肪酶,亚硝酸盐等多项质量指标的检测,符合多国药典规定(USP, EP, JPE, ChP),可用于生物治疗性药物和疫苗的生产。产品信息: · 产品名称: L-Arginine, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals, USP,EP, JP, ChP (A-170)· 中文名称:L-精氨酸· 分子式:C6H14N4O2· 分子量:174.20 g / mo· CAS号:74-79-3· 产品货号:A-170产品特点:· 超高纯度,超低内毒素,超低微生物含量,超低金属杂质残留· 质量指标新增DNA,RNA,DNA酶,RNA酶,脂肪酶和亚硝酸盐检测· 符合多国药典:USP, EP, JPE, ChP· 符合ICH Q3D标准· 符合GMP标准产品应用:· 缓冲液· 降粘 如果您对Pfanstiehl的注射级L-精氨酸A-170 感兴趣,可联系Pfanstiehl中国区代理tyc1286太阳集团获得详细的产品概况说明文件如下。也欢迎联系获取测试样品。Pfanstiehl Inc.产品系列如下,欢迎联系tyc1286太阳集团 获取100g装免费样品。 tyc1286太阳集团为Pfanstiehl中国代理,为客户提供完善的技术支持与售后服务。欢迎拨打tyc1286太阳集团客服电话400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>抗体片段捕获的利器---Fabsorbent™ F1P HF亲和层析填料
近年来,抗体和抗体片段在生物大分子治疗和诊断领域备受关注,很多抗体类药物已经步入商业化生产阶段。相较于完整的抗体,抗体片段分子量低,组织渗透性好,少有复杂的糖基化结构,可以使用多种原核或真核细胞培养平台进行表达,已成为很多生物技术公司的研究热点。与完整的抗体不同,很多抗体片段分子结构中没有Fc端,无法用传统的Protein A亲和层析填料进行捕获,而Protein L亲和层析填料,由于可以结合抗体轻链的可变区域,为抗体片段的捕获提供了可靠的技术手段。但市面上常见的Protein L亲和层析填料稳定性普遍较低,填料无法耐受高浓度碱液的清洁,配基脱落严重,且价格昂贵,给纯化工艺带来了极大的挑战。 FabsorbentTM F1P HF是Astrea Bioseparations公司近年来推出的亲和层析填料,填料基架是粒径均一的高交联琼脂糖,基架上修饰有化学合成的小分子配基,可以高效捕获各种抗体片段分子。相较于Protein L亲和层析填料,FabsorbentTM F1P HF的结合范围更广泛,填料可以耐受高达1M NaOH的清洁,其主要优势特点归纳如下: 结合范围广,既可以结合kappa型轻链,也可以结合lambda型轻链,对一些非人源性的抗体(如鼠源性、牛源性、羊源性等)也有一定的结合能力,可广泛地用于F(ab’)2, Fab, scFv, VL, IgG的捕获。 小分子化学合成配基,无动物源性,稳定性好,安全性高。 填料可以耐受0.5-1M NaOH的清洁和消毒,清洁效果好,寿命长。 应用案例1:FabsorbentTM F1P HF捕获F(ab’)2抗体片段 在该测试案例中,研究人员使用胃蛋白酶将完整的IgG水解为Fc和F(ab’)2片段,并上样到FabsorbentTM F1P HF层析柱中,工艺参数如下表所示: 层析柱: CV=10mL 层析填料: FabsorbentTM F1P HF 流速: 250cm/h 平衡液: 25mM Tris-HCl, pH 8.0 洗脱液: 50mM sodium citrate, pH 3.0 清洁: 0.5M NaOH 由图1的层析图谱和图2的SDS-PAGE电泳图谱可以看出,FabsorbentTM F1P HF可以高效捕获料液中的F(ab’)2片段,经洗脱后,得到高纯度的F(ab’)2分子,层析前添加的胃蛋白酶可被有效去除。 图1:FabsorbentTM F1P HF捕获F(ab’)2的层析图谱 图2:SDS-PAGE电泳图谱(Lane 1是molecular weight marker;Lane 2是IgG标准品;Lane 3是胃蛋白酶水解后料液;Lane 4是流穿和淋洗液;Lane 5是洗脱液。) 应用案例2:FabsorbentTM F1P HF捕获CHO表达的Fab抗体片段 在该应用案例中,研究人员使用CHO细胞表达Fab抗体片段,细胞收获液经澄清后,上样到FabsorbentTM F1P HF层析柱中,工艺参数如下表所示: 层析柱: 10mm×5cm,CV=4mL 层析填料: FabsorbentTM F1P HF 流速: 300cm/h,上样流速50cm/h 平衡液: 50mM sodium phosphate, pH 8.0 上样: 澄清后的CHO细胞收获液(含Fab),pH 8.0 洗脱液(测试1): 50mM sodium citrate, pH 3.0 洗脱液(测试2): 50mM sodium acetate, pH 4.0 淋洗液(测试3): 50mM glycine-NaOH, pH 9.0 洗脱液(测试3): 50mM sodium acetate, pH 4.0 清洁: 0.5M NaOH 测试还研究了不同的洗脱工艺条件,测试1采用了pH 3.0的等度洗脱方式,测试2采用了pH 4.0的等度洗脱方式,测试3先采用pH 9.0的甘氨酸缓冲液进行上样后的淋洗,随后用pH 4.0的醋酸盐缓冲液进行等度洗脱。 由图4的SDS-PAGE电泳图谱可以看出,FabsorbentTM F1P HF可以有效捕获细胞收获液中的Fab抗体片段。三种洗脱方式均可以确保大于90%的目标Fab纯度,且回收率极高。其中,在测试2的洗脱条件下,Fab纯度和回收率最高。在测试3的条件下,洗脱前使用pH 9.0的甘氨酸缓冲液淋洗能去除少量非特异性结合的杂质蛋白。 图3:FabsorbentTM F1P HF捕获Fab的层析图谱(测试2) 图4:SDS-PAGE电泳图谱(Lane 1是molecular weight marker;Lane 2是纯化后的Fab对照品;Lane 3澄清后的CHO细胞收获液;Lane 4是测试1的流穿液;Lane 5是测试1 的洗脱液;Lane 6是测试2的流穿液;Lane 7是测试2的洗脱液;Lane 8是测试2的再生液(citrate, pH 3.0);Lane 9是测试3的流穿液;Lane 10是测试3的淋洗液;Lane 11是测试3的洗脱液。) 应用案例3: FabsorbentTM F1P HF捕获E.coli表达的VL抗体片段 在该应用案例中,研究人员使用E.coli表达VL抗体片段,经细胞裂解和澄清后,直接上样到FabsorbentTM F1P HF层析柱中,工艺参数如下表所示: 层析柱: CV=1mL 层析填料: FabsorbentTM F1P HF 流速: 保留时间=3min 平衡液: 25mM Tris-HCl, pH 9.0 洗脱液: 50mM sodium citrate, pH 3.0 清洁: 0.5M NaOH 由图5的层析图谱和图6的SDS-PAGE电泳图谱可以看出,FabsorbentTM F1P HF可以有效捕获复杂料液中的VL抗体片段,大量杂质蛋白在上样和淋洗过程中被去除,经洗脱后,可以得到纯度极高的目标分子VL。 图5:FabsorbentTM F1P HF捕获VL的层析图谱 图6:SDS-PAGE电泳图谱(Lane 1是molecular weight marker;Lane 2是澄清后的E.coli裂解液;Lane 3是流穿液;Lane 4是淋洗液;Lane 5是洗脱液;Lane 6是清洁液。) FabsorbentTM F1P HF亲和层析填料的技术参数 配基: 化学合成的三嗪类配基 基架: 粒径均一的高交联琼脂糖(PuraBead® 6HF) 平均粒径: 90±10µm 结合载量: Human Fab: 20mg/ml adsorbent Human IgG: ≥40mg/ml adsorbent 操作流速: up to 500cm/h pH稳定性: 3-13(三个月以上的长期测试数据) 清洁/消毒: 0.5-1M NaOH, 25℃ 保存: 20%乙醇,2-30℃ FabsorbentTM F1P HF亲和层析填料产品信息 散装填料 货号 产品名称 规格 3904-00025 FabsorbentTM F1P HF 25 mL 3904-00100 FabsorbentTM F1P HF 100 mL 3904-00500 FabsorbentTM F1P HF 500 mL 3904-01000 FabsorbentTM F1P HF 1 L 预装柱 货号 产品名称 规格 6632 FabsorbentTM F1P HF Column Kit, 4 x 1 ml 4 x 1 ml预装柱 6633 FabsorbentTM F1P HF Column Kit, 4 x 5 ml 4 x 5 ml预装柱 2233 FabsorbentTM F1P HF PuraPlate 96孔板 参考资料: S. Kittler et al., Protein L-more than just an affinity ligand, 2021 Brochure: Purify and capture of antibody fragments with a new synthetic ligand affinity adsorbent FabsorbentTM F1P HF, Astrea Bioseparations Technical Note: Fab and F(ab’)2 fragment purification from CHO cell culture supernatant using Fabsorbent™ F1P HF, Astrea Bioseparations Technical User Guide: FabsorbentTM F1P HF, Astrea Bioseparations Astrea Bioseparations于1987年孵化自剑桥大学,拥有超过30年层析介质研发和生产经验,是世界级层析介质产品与服务供应商。目前使用Astrea的产品已有超过21个生产工艺通过了FDA和EMA的批准。Astrea Bioseparations在全球拥有3个研发和生产基地,专注为生物大分子和CGT领域提供行业领先的层析介质和技术服务。Astrea Bioseparations推出的基于纳米纤维的新型层析技术,解决了传统生物分离工具载量低和工艺耗时问题,实现更快、更环保、更具成本效益的纯化过程,完全符合当今生物治疗创新的需求。 tyc1286太阳集团是Astrea Bioseparations中国区代理,为用户提供完善的技术支持与售后服务。欢迎随时拨打tyc1286太阳集团客服热线400-050-4006或登录网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>新年首发 I Pfanstiehl 重磅推出注射级甘氨酸Glycine (G-140)
甘氨酸是结构最简单的氨基酸,学名氨基乙酸,分子式为C2H5NO2。常温下是白色结晶或结晶性粉末,味甜。它极易溶于水,在乙醇、丙酮这些有机溶剂里也能溶解,展现出较好的亲水性。甘氨酸分子内既有酸性羧基(-COOH),又有碱性氨基(-NH2),这使其既能和酸反应,也能与碱反应,在不同的pH环境呈现出多样的离子化状态,缓冲能力出色。因其特点,甘氨酸在医药辅料制剂中应用广泛,并具有诸多优势,如以下应用:缓冲剂: 甘氨酸分子的两性离子特点,使其在不同的pH环境能稳定溶液酸碱度,让制剂环境维持稳定,保障药物活性成分不受酸碱性变动影响,这对生物制品、酶类药物等对pH敏感的药物制剂极为关键。增溶剂:甘氨酸亲水性良好,能够和难溶性药物分子相互作用,降低药物分子之间的聚集,让药物以分子或离子态分散,增加其在溶剂里的溶解度,有助于难溶药物制成溶液剂。 稳定剂:在蛋白类、多肽类药物制剂里,甘氨酸能够优先与周围水分子结合,减少药物分子的水化层干扰,防止药物因聚集、变性而失活,能很好的维持这类生物大分子药物的稳定性。但甘氨酸在应用于医药辅料时也有其局限性,如在应用于冻干制剂时,容易发生结晶形态异常,在与其他辅料一同使用时,会改变整个冻干体系的塌陷温度;在被用于调节注射剂渗透压时,使用不当会容易导致渗透压过高等。尤其是,甘氨酸作为药用辅料对纯度要求极高,甘氨酸原料中的杂质,哪怕是微量存在,进入人体后也能引发免疫反应或毒副作用。提纯甘氨酸达到注射级标准,技术难度大且成本高,所以一定程度限制了它在药用制剂中的大规模应用。Pfanstiehl秉承一贯高品质理念,为满足全球生物制药行业对于高品质甘氨酸的需求,隆重推出注射级甘氨酸Glycine (G-140), 具有超高纯度,超低内毒素,超低金属残留的特点,单独检测29种金属离子,并且新增DNA,RNA,DNA酶,RNA酶和脂肪酶,亚硝酸盐等多项质量指标的检测,符合多国药典规定(USP, EP, BP, JPE, ChP),可用于生物治疗性药物和疫苗的生产。 产品信息: · 产品名称:Glycine, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals, USP, EP, BP, JPE, ChP (G-140)· 中文名称:甘氨酸· 分子式:C2H5NO2· 分子量:75.07 g / mol· CAS号:56-40-6· 产品货号:G-140产品特点:· 超高纯度,超低内毒素,超低微生物含量,超低金属杂质残留· 质量指标新增DNA,RNA,DNA酶,RNA酶,脂肪酶和亚硝酸盐检测· 符合多国药典:USP, EP, BP, JPE, ChP· 符合ICH Q3D标准· 符合GMP标准· 美国DMF和中国CDE药用辅料登记工作进行中产品应用:· 缓冲剂· 稳定剂· 增溶剂如果您对Pfanstiehl注射级别Glycine G-140感兴趣,欢迎联系Pfanstiehl 中国区代理tyc1286太阳集团获得如下详细的产品概况说明文件和测试样品。 Pfanstiehl Inc.其他产品系列如下,欢迎联系北京tyc1286太阳集团获取100g装免费样品。tyc1286太阳集团为Pfanstiehl中国代理,为客户提供完善的技术支持与售后服务。欢迎拨打tyc1286太阳集团客服电话400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>【技术在线】HCP ELISA方法验证——加标回收(Spike & Recovery)
前言 在ELISA试剂盒的使用过程中,确保结果的准确性至关重要。为了有效识别样品配方与试剂盒组分之间的兼容性,加标回收这一关键验证试验显得尤为重要。它不仅是评估ELISA试剂盒准确性的重要工具,也是满足法规和药典(如ICH或FDA指南等)对商品化ELISA试剂盒方法学验证要求的可靠方式。 什么是加标回收? 加标回收就是将已知量的标准品添加到样品中(“加标”,spiking),通过对比加入前后的检测结果,评估“回收”(recovery)测量值的准确性。这一过程可以揭示样品及其缓冲液中某些成分是否会干扰检测结果。目前,影响ELISA试剂盒定量结果的常见因素包括极端pH、去污剂、有机溶剂、高蛋白质浓度以及高盐浓度等。因此,在进行加标回收实验之前,确保排除这些干扰因素是至关重要的。 如何判定干扰因素? 样品或缓冲液中的某些成分可能会影响HCP或其他杂质的检测与定量,导致回收结果的高估或低估,由此说明样品中存在干扰因素。同样,上游收获物和过程样品的基质中也可能存在疑似干扰 ELISA 检测的成分。 在有干扰的情况下,实验结果通常表现为回收率偏低。但是,如果药物本身或其他基质组分与捕获或检测抗体有相互作用,则可能表现为回收率偏高。 此外,非特异性干扰,如试剂与孔板的结合,也会导致OD值偏高。通过合理控制实验流程,可以找出具体的干扰因素。 何时进行加标回收实验? 在进行加标回收实验前,需要先完成样品的稀释线性分析,只有明确了最低需求稀释倍数(MRD),加标回收分析才有意义。(稀释线性分析的详细内容请参考《HCP ELISA方法验证——稀释线性dilution linearity》) (Tips:每种类型的样品基质都需要进行加标回收分析。同时如果实验步骤进行了优化,则需要重复此实验以确保检测的有效性。) 如何执行加标回收分析? 样品制备: 加标样品:可以设定3-4个不同浓度的标准品加入到不同类型待检样品中,制备成加标样品,需要注意的是加标样品的浓度需在满足MRD的条件下进行分析,也就是最低加标浓度不能低于LOQ的两倍。 对照样品:按相同体积比在每种待检样品中加入样品稀释液,制备成对照样品,用于测定样品本底的HCP浓度。 实验过程: 使用ELISA试剂盒同时检测加标样品和对照样品,每个样品最好做3个重复孔,以计算均值。 结果分析: 回收率计算公式: 如下表案例所示,我们使用大肠杆菌HCP ELISA试剂盒(F410)分别检测加标样品(100 ng/mL标准品与样品按1:4体积比混合,加标浓度为20 ng/mL)和对照样品(样品稀释液与样品按1:4体积比混合),通过测得的HCP浓度计算出回收率为95%。依据ICH、FDA及EMA等分析方法验证指南要求,HCP加标回收率的可接受范围应在75%~125%。 为了方便您快速了解如何用4倍稀释法制备加标样品和ELISA布板的详细步骤,请观看以下操作视频。加标回收问题排查 如果加标回收数据显示出明显的产物或基质干扰,您可能需要通过进一步稀释样品或置换缓冲液等方式来获取准确的检测结果。理想情况下,请选择与标准品相同的稀释液进行样品稀释,这样可以最大限度地减少偏差。在某些情况下,调整检测方法也许能提高特定样品类型的准确性,但请务必谨慎操作,以免影响结果的可靠性。 为了全力支持客户进行加标回收验证及方法学开发,Cygnus为每款ELISA试剂盒都配备了相应的标准品,详情请查阅下表。货号品名规格适用的试剂盒货号F553H-1CHOHCP Antigen Concentrate, 3G400 µlF550-1F1048XCHO Lysate HCP AntigenConcentrate200 uLF1045F1023XE.coli HCP 2G Antigen Concentrate200 uLF1020F1063XBL21(DE3) HCP AntigenConcentrate200 µlF1060F653SXHEK293 Antigen Concentrate250 µlF650SF1043XSf9 HCP 3G AntigenConcentrate200 µlF1040F1018XP.pastoris HCP Antigen Concentrate200 µlF1015F143UP. pastoris AntigenConcentrate200 µlF140/F640F978XVeroCell 2G HCP Antigen Concentrate400 µlF975F1058XPER.C6 HCP 2G AntigenConcentrate200 µlF1055F1033XSP2/0HCP 2G Antigen Concentrate200 uLF1030F998XPG13 HCP AntigenConcentrate200 uLF995F493GL.lactis HCP Antigen Concentrate 200 µlF490F233GA549 Antigen Concentrate200 µlF230F813XHeLaAntigen Concentrate1 mlF810F803XMDCK Antigen Concentrate1 mlF800F513GBHKHCP Antigen Concentrate1 mlF510F227CNS/0 Antigen Concentrate1 mlF220F453XP.fluorescens Antigen Concentrate1 mlF450F823XCAP® Antigen Concentrate400 µlF820F1028XC1HCP Antigen Concentrate200 uLF1025F603XProtein A AntigenConcentrate250 µlF600F613XProteinA Antigen Concentrate250 µlF610F403HProtein A AntigenConcentrate200 µlF400F044ProteinA Concentrate200 µlF050/F050HF740-CAmsphere™ A3 Ligand Protein A Control250 µlF740F968XAvantorJ.T.Baker® BAKERBOND® PROchievA™ Protein A Antigen Concentrate250 µlF965F743XAmsphere™ A3 Ligand Protein A Antigen Concentrate300 µlF740F1068XProteinL Antigen Concentrate200 µlF1065F963XEndonucleaseGTP® AntigenConcentrate500 µlF960F031GBSAAntigen Concentrate1 mlF030虽然加标回收可以验证HCP ELISA的准确性,但这只是整体方法学验证的一部分。完整的验证过程仍需包括精密度、LOD、LLOQ、ULOQ和HCP抗体覆盖率等分析。Cygnus针对每一种检测试剂盒均提供相应的QS(Qualification Summary)文件,如有需求欢迎点击这里填写信息索取,或直接联系Cygnus中国总代理tyc1286太阳集团。如您在使用Cygnus HCP ELISA试剂盒的过程中遇到任何问题,我们的技术支持团队将竭诚为您提供解决方案和建议。Cygnus Technologies专注为生物技术和生物制药行业提供产品和分析方法超过25年,旨在加速研发阶段和提高产品质量。Cygnus开发和生产的生物工艺残留试剂盒,用于检测超过50种不同表达系统的特异性杂质。Cygnus作为专注于生物技术应用免疫检测的高灵敏度分析技术的专家,其产品和服务已经被全球超过95%以上生物制药公司使用,并获得FDA、NMPA、EMA等监管机构的广泛认可。tyc1286太阳集团作为Cygnus在中国总代理,与国内众多知名药企,CRO/CMO企业建立了长久稳定的合作关系。多年来tyc1286太阳集团的产品及服务帮助许多企业加速R&D阶段,提高药物质量、纯度和安全,加速优化研发工艺,减少产品上市时间,降低QC成本。如您对上述产品感兴趣,欢迎致电tyc1286太阳集团客服热线400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>